Skip to content

złośliwy nowotwór płuc

4 miesiące ago

644 words

Są to składniki kompleksu represora polycomb 2 (PCR2), który promuje metylację histonu 3 przy lizynie 27 (skorygowany względem FDR P. 0,05, dokładny test Fishera) (Figura 8A, góra, dodatkowa Figura 9A, i Tabela dodatkowa 4) . Ostatnio doniesiono, że STAT5 przeciwstawia się sieci czynników transkrypcyjnych, takich jak NF-kB i IKAROS w ostrej białaczce limfoblastycznej z komórek B (52) i współdziała z EZH2 (35). Ponadto ekspresja TOP2A była wcześniej związana z ekspresją EZH2 w agresywnym raku prostaty (53). Konsekwentnie, stwierdzono, że geny docelowe EZH2 i SUZ12 są wzbogacone w komórki T CD8 + pochodzące od myszy hSTAT5BN642H (Figura 8B, Suplementowa Figura 9B i Tabela Uzupełniająca 5). Fig. 8 Zmiany metylacji DNA prowadzone przez HTSTAT5BN642H, którym towarzyszy zwiększona aktywność STAT5 wiązania DNA, powodują indukcję kinazy Aurora B. (A) Analiza zestawu do wzbogacania zestawu regionów z CGI o niższej metylacji DNA w komórkach hSTAT5BN642H niż w komórkach WT (u góry) lub niższych Metylacja DNA w komórkach WT niż w komórkach hSTAT5BN642H (na dole). Wzbogacanie określono za pomocą LOLA (51). Każda kropka reprezentuje eksperyment ChIP-seq dla danego czynnika transkrypcyjnego z bazy danych CODEX. Pionowa linia przerywana przedstawia próg istotności (skorygowany względem FDR P. 0,05). (B) Blot wzbogacony w docelowe geny EZH2 w HSC wraz z ich stanami metylacji związanych z EZH2 i niezwiązanych z EZH2 CGI 100 kb powyżej i poniżej miejsca startu transkrypcji (TSS). Blot kodu kreskowego wskazuje pozycję genu w zestawie genów. Kolory czerwony i niebieski przedstawiają odpowiednio dodatnie i ujemne korelacje Pearsona z limfocytami T CD8 + hSTAT5BN642H. Zestaw genów otrzymano z MSigDB (72). Czarne kółka oznaczają CGI nakładające się na miejsca wiążące EZH2. pp, punkty procentowe. n = 2 na genotyp. CHIP z anty-STAT5 (C) lub anty-EZH2 (D) w limfocytach T CD8 + izolowanych z myszy WT (n = 7), hSTAT5B (n = 7) lub hSTAT5BN642H (n = 4). Wiązanie STAT5 z promotorami Cis i Ccnd2 lub wiązanie EZH2 z regionami promotora Cdkn2A i Ccnd2 służyło jako kontrola pozytywna. Pozioma linia przerywana wskazuje próg niespecyficznego wiązania. (E) ChIP z anty-STAT5, anty-EZH2 lub IgG w komórkach T CD8 + wyrażających STAT5BN642H, a następnie analiza WB. IB, immunoblot. Dane przedstawione w C. E są reprezentatywne dla 2 niezależnych eksperymentów. Paski błędów wskazują średnią. SD. Aby zbadać, czy STAT5BN642H odgrywa rolę w regulacji w górę tych genów, przeprowadziliśmy ChIP z wyizolowanymi limfocytami T CD8 + z myszy WT, hSTAT5B i hSTAT5BN642H. Biorąc pod uwagę jego status hiperaktywacji, wiązanie hSTAT5BN642H z DNA zwiększyło się w porównaniu z wykrywanym w mysim WT mysim STAT5B i hSTAT5B. Zmutowany STAT5 zwiększył swoje wiązanie z promotorem Cis i został również znaleziony w regionach promotorowych znanych celów EZH2 Cdkn2a i Ccnd2. Ponadto wiąże się z mniej metylowanym CGI w połączeniu z Aurkb (ryc. 8C). Chociaż stwierdzono, że wiązanie EZH2 ulega zmniejszeniu w limfocytach T CD8 + hSTAT5BN642H, EZH2 zachowało swoje wiązanie przy tym samym CGI (Figura 8D i Suplementowa Figura 9C). Jednakże nie wykazano, że hSTAT5BN642H ma bezpośrednie interakcje z EZH2 (Figura 8E). Komórki T wyrażające STAT5BN642H są wrażliwe na hamowanie AURKB. Wśród docelowych genów EZH2, geny kodujące kinazę Aurora B (Aurkb) i topoizomerazę DNA 2. (Top2a) były znacząco podwyższone, a cele AURKB były wysoce wzbogacone w komórki T CD8 + wyrażające hSTAT5BN642H (Figura 8B i Suplementowa Figura 10A). Analiza Western blot wykazała, że myszy hSTAT5BN642H miały wyższą aktywność AURKB, a ilościowa analiza PCR (qPCR) zwalidowała zależną od hSTAT5BN642H regulację w górę poziomów Aurkb w limfocytach T CD8 + (Figura 9A i Suplementowa Figura 10B)
[więcej w: porażenie piorunem, osa a pszczoła, pszeniczny brzuch ]

0 thoughts on “złośliwy nowotwór płuc”