Skip to content

sklep ortopedyczny poznań lutycka

3 tygodnie ago

448 words

Konsekwentnie, mysie zarodkowe fibroblasty (MEF) pochodzące od myszy Cbx7-KO miały wyższą szybkość wzrostu i opóźnione starzenie w porównaniu z ich odpowiednikami WT. Zdolność CBX7 do przeciwdziałania aktywacji ekspresji CCNE1 przez białka HMGA prawdopodobnie odpowiada pewnym fenotypowym cechom myszy Cbx7-KO. Znaleźliśmy również odwrotną korelację między CBX7 a ekspresją cykliny E w ludzkich raku płuc, co wskazuje, że utrata ekspresji genu CBX7 odgrywa istotną rolę w karcinogenezie płuc. Wyniki Generowanie myszy Cbx7-KO. Wykorzystaliśmy techniki celowania genowego w komórkach ES, aby wygenerować mutację zerową w mysim locus genomowym Cbx7. Wektor celujący został zaprojektowany w celu zastąpienia eksonów 5 i 6 mysiego genu Cbx7 kasetą neomycynową (Figura 1A). Kod Exons 5 i 6 dla C-końcowego regionu białka, w tym domeny domeny Pc wymaganej dla jego funkcji. Potomstwo chimerycznych zwierząt zidentyfikowano przez analizę Southern biot strawionego EcoRI DNA (Fig. 1B) i ustalono kojarzenie w celu wytworzenia myszy heterozygotycznych lub homozygotycznych względem allelu Cbx7-zerowego. Aby zweryfikować brak ekspresji Cbx7 w Cbx7. /. myszy, całkowity RNA z nerki, wątroby, płuc i MEF myszy WT i Cbx7-KO badano metodą Northern blot. Zgodnie z oczekiwaniami, Cbx7. /. mutanty nie ekspresjonowały transkryptu Cbx7, który był obecny w tkankach myszy WT, podczas gdy Cbx7 + /. mutanty wyrażały pośrednią ilość mRNA Cbx7 (Figura 1C). Northern blot nie wykazywał żadnego pasma 380 pz, odpowiadającego potencjalnemu transkryptowi eksonów 4 4 genu Cbx7, które nie są zakłócane przez konstrukt targetujący. Co więcej, Western blot przeprowadzono przy użyciu przeciwciał zdolnych do rozpoznawania 5. region białka CBX7 nie wykazywał ekspresji produktu potencjalnie skróconego transkryptu (dodatkowa postać 1, materiał uzupełniający dostępny online w tym artykule; doi: 10.1172 / JCI58620DS1). Jest prawdopodobne, że ten krótki posłaniec jest zdegradowany i nie koduje żadnego białka. Figura Generacja myszy Cbx7-KO. (A) Endogenny allel WT, docelowy wektor i powstały allel KO. E, EcoRI; Neo, neomycyna; Ex, ekson. (B) Southern blot reprezentatywnych Cbx7 + / + i Cbx7 + /. Klony komórek ES. (C) Analiza metodą northern blot całkowitego RNA z nerek, płuc i MEF z Cbx7 + / +, Cbx7 + / a i Cbx7a / b. myszy. Wykazywane są długości transkryptu WB Cbx7 (2900 bp) i przewidywana skrócona forma po homologicznej rekombinacji z konstruktem Cbx7-KO (380 bp). Brak sygnału 380-bp w obu Cbx7 + /. i Cbx7. /. myszy są prawdopodobnie wynikiem niestabilności krótkiego transkryptu. Analizę ekspresji Actb tego samego błota pokazano jako kontrolę załadowanego RNA. (D) Wygląd brutto reprezentatywnego 1-letniego Cbx7. /. myszy i dobraną pod względem płci siostrę Cbx7 + / +. (E) Długość kohorców nosowo-analalnych 20 myszy, mężczyzn lub kobiet została zmierzona w wieku 12 miesięcy. Wartości są średnie. SD. * P <0,05. Krążenie heterozygota dało Cbx7 + / +, Cbx7 + / a i Cbx7a / r. potomstwo w przybliżeniu oczekiwanej proporcji Mendla, co wskazuje na brak wyraźnej śmiertelności embrionalnej. Co ciekawe, myszy Cbx7-KO wykazywały znaczący wzrost długości ciała nosowo-odbytowego: 70% kobiet i 46% mężczyzn wykazywało średni wzrost odpowiednio o 6,5% (P = 0,041) i 16% (P = 0,044) w porównaniu z ich odpowiedniki WT (rys. 1, D i E). Cbx7. /. MEF-y rosną szybciej i stają się późniejsze niż ich odpowiedniki Cbx7 + / +. Aby zbadać rolę CBX7 w proliferacji komórkowej, przeanalizowaliśmy szybkość wzrostu i rozkład cyklu komórkowego MEF z Cbx7 + / +, Cbx7 + / p i Cbx7a / r. zarodki o 12,5 dpc. Jak pokazano na rysunku 2A, tempo wzrostu było znacznie wyższe w Cbx7a / r. MEFs niż w Cbx7 + / + kontrole i półprodukt w Cbx7 + /. MEF [patrz też: osa a pszczoła, płatki jaglane właściwości, pluskwy ugryzienia ]

0 thoughts on “sklep ortopedyczny poznań lutycka”

  1. [..] odnosnik do informacji w naukowej publikacji odnosnie: mezoterapia igłowa warszawa[…]