Skip to content

Przeciwciała przeciwko proteazie rozszczepiającej czynnik von Willebranda w ostrym zakrzepowym trombocytopenicznym Purpura ad

1 miesiąc ago

498 words

Żaden z pacjentów nie miał stężenia kreatyniny w surowicy większego niż 4 mg na decylitr (354 .mol na litr) lub wymaganej dializy nerek. Trzydziestu pacjentów było leczonych w naszych placówkach, a siedem zostało skierowanych z innych szpitali. Wiadomo, że sześciu pacjentów miało wcześniej epizody choroby lub dodatkowe epizody po pobraniu próbek osocza. Dwóch pacjentów miało zakażenie wirusem HIV, jeden miał historię układowego tocznia rumieniowatego, a jeden miał czynnik reumatoidalny i przeciwciała przeciwko DNA. Próbki krwi zebrano w probówkach zawierających cytrynianowy antykoagulant przed lub po zakończeniu terapii plazmą wymienną lub podczas remisji, gdy liczba płytek krwi była normalna i stabilna. Przebadaliśmy także próbki osocza od 35 zdrowych osób lub ambulatoryjnych lub hospitalizowanych pacjentów bez zakrzepowej plamicy małopłytkowej; 21 pacjentów z różnymi zaburzeniami autoimmunologicznymi lub krwiopochodnymi, w tym rozsianą koagulopatią wewnątrznaczyniową (1 pacjent), małopłytkowością autoimmunologiczną (2 pacjentów), małopłytkowością indukowaną lekami (2 pacjentów), zespołem HELLP (hemoliza, podwyższone aktywności enzymów wątrobowych i mała liczba płytek krwi w skojarzeniu z stanem przedrzucawkowym, pacjentem), zakrzepicą żył głębokich (1 pacjent), antykoagulantem toczni z zakrzepicą (1 pacjent), zaburzeniami mieloproliferacyjnymi (4 pacjentów), niedokrwistością sierpowatą (5 pacjentów), hemofilią A (1 pacjent) i von Willebranda choroba (3 pacjentów); i 18 pacjentów z małopłytkowością indukowaną heparyną. Szesnaście z 18 próbek osocza od pacjentów z małopłytkowością indukowaną heparyną zostało dostarczonych przez dr. GP Visentina z Krwawego Centrum Południowo-Wisconsin w Milwaukee. Test uwalniania serotoniny indukowany heparyną był dodatni we wszystkich 17 badanych próbkach osocza. U 8 pacjentów z małopłytkowością indukowaną heparyną wystąpiły powikłania zakrzepowe. Protokół dochodzeniowy został zatwierdzony przez komisje przeglądowe instytucji uczestniczących w programie.
Kontrolne osocze składało się z połączonego normalnego osocza stosowanego w klinicznym laboratorium koagulacyjnym. Osocze oddzielono od pełnej krwi przez dwuetapowe wirowanie 15 i przechowywano w temperaturze -70 ° C. Frakcje kriosupernatant otrzymano przez odwirowanie w 4 ° C z próbek osocza rozmrożonych na lodzie.15 Próbki osocza z dwóch pacjentów badano również przed zamrożeniem, po wirowaniu z dużą prędkością przy 30 000 xg przez 60 minut i po przejściu przez 0,2-.m. filtry.
Przygotowanie czynnika von Willebranda
Czynnik Von Willebranda oczyszczono z połączonego normalnego osocza przez wytrącanie solami glicyny i filtrację żelową.17 Frakcje wymywane z kolumny chromatograficznej, która zawierała największe multimery w stężeniu 150 do 250 .g na mililitr, eksponowano na guanidynę (1,5 mola na litr ) i użyte jako substrat do testu proteazowego.
Multimery czynnika von Willebranda analizowano przez elektroforezę z dodecylosiarczanem sodu i żelem agarozowym, jak opisano wcześniej18. Wielkość multimerów była reprezentowana przez odległość od punktu początkowego elektroforezy do piku rozkładu multimerycznego, określonego przez densytometrię, podzielonego. przez szczytową odległość kontrolnego czynnika von Willebranda (znormalizowana odległość szczytowa) .18 Wzrost znormalizowanej odległości szczytowej wskazuje na zmniejszenie wielkości multimerów
[podobne: citalopram, dienogest, dekstran ]
[więcej w: osa a pszczoła, pasożyty wewnętrzne, pęcherzowe oddzielanie się naskórka ]