Skip to content

Mutacje w genie Connexin 26 (GJB2) wśród Żydów aszkenazyjskich z nieprzytomną recesywną głuchotą ad

1 miesiąc ago

487 words

Próbki wykazujące polimorfizmy konformacyjne zostały zsekwencjonowane bezpośrednio (ThermoSequenase, Amersham Life Sciences, Arlington Heights, IL) za pomocą starterów PCR. Populacyjne próbki DNA
Ponieważ kontrola populacji próbek z rodzin żydowskich aszkenazyjskich, wykorzystaliśmy próbki krwi bez osobistych identyfikatorów z grupy 555 aszkenazyjczyków, którzy przechodzili testy genetyczne na jedną lub więcej autosomalnych chorób recesywnych (w tym choroba Tay-Sachsa, choroba Canavana, choroba Gauchera, i mukowiscydoza) .14 Brak informacji na temat rodzinnej utraty słuchu u tych osób kontrolnych. Próbki od tych osobników kontrolnych były wcześniej wykorzystywane do badań populacyjnych genetyki mutacji w aspartoacylazie, podatności na raka piersi (BRCA2) i genach gruczolakowatych polipowatych coli (APC). 15-17 Anonimowe próbki DNA reprezentujące biel, azjatycki i czarny grupy rasowe i etniczne zostały zebrane na Uniwersytecie Stanowym w Michigan w celu porównania częstotliwości populacji.
Próbki DNA amplifikowano za pomocą PCR dla GJB2, jak opisano powyżej, a następnie sekwencjonowano w celu określenia obecności alleli 167delT i 30delG. Wszystkie próbki były również typowane do genetycznych markerów D13S141, D13S175 i D13S250, które flankują GJB2 na chromosomie 13, przez wbudowanie [.33P] trifosforanu deoksycytydyny i rozdzielane na konwencjonalnych żelach do sekwencjonowania. Testy asocjacji pomiędzy mutacjami w GJB2 i pobliskimi markerami genetycznymi przeprowadzono za pomocą programu EH (Haplotypowe częstotliwości oszacowania). 18 Testy istotności różnic między szybkościami nośników obliczono za pomocą programu 2BY2, który wykonuje dokładny test Fishera.18 Wiek mutacji 167delT oszacowano za pomocą następującego wzoru: y = x + (1- x) (1-.) g, gdzie y jest częstością alleli przodków wśród chromosomów niosących mutacje, x jest jego częstotliwością wśród normalnych chromosomów, . jest frakcją rekombinacyjną między allelem markerowym a mutacją, a g jest liczbą pokoleń.19
Analiza audiologiczna
Rysunek 1. Rysunek 1. Rodowody rodzin A, B i C. Rodowody zostały zmodyfikowane, aby chronić anonimowość rodzin. Potomstwo o tych samych genotypach i fenotypach jest reprezentowane przez pojedynczy symbol; liczba wewnątrz symbolu wskazuje liczbę reprezentowanych przedmiotów, jeśli jest ich więcej. Kolejność urodzenia nie jest dokładnie reprezentowana. Numery identyfikacyjne każdego przedmiotu są wymienione poniżej lub po prawej stronie symboli; numery identyfikacyjne, które są zacienione, wskazują podmioty, które przeszły testowanie emisji otoakustycznych w wyniku zniekształceń. Należą do nich rodzice w rodzinach A i B, jedno nienarażone dziecko nie będące nosicielem w rodzinie A, dwaj nieobrzezani nosiciele allelu 167delT w rodzinie B oraz trzy nietknięte nosicielami allelu 30delG w rodzinie B. Solidne symbole oznaczają osoby niesłyszące, otwarte symbole nie są naruszone osób i plus znaki allelu typu dzikiego. .G oznacza mutację 30delG i .T mutację 167delT.
Audiometria tonów czystych, testowanie imisji ucha środkowego i rejestracja emisji otoakustycznych zostały przeprowadzone u 10 osób z rodzin A i B, które miały prawidłowy słuch i znane genotypy GJB2
[przypisy: hurtownia portfeli, buprenorfina, przetoka okołoodbytnicza ]
[przypisy: przetoka okołoodbytnicza, przetoka zębowa, przewlekła niewydolność żylna ]