Skip to content

leczenie nowotworów warszawa

3 tygodnie ago

571 words

Po ekspozycji na światło UV, dwurodnik karbenowy powstały w wyniku eliminacji N2 z diaziryny ma wyjątkowo krótki okres półtrwania, z reaktywnością ograniczoną dyfuzją z wodą (46). Zatem, w obecności partnera wiążącego HDL, takiego jak PON1, przewiduje się, że ekspozycja na światło UV będzie wytwarzać kowalencyjny addukt tylko z resztami PON1 w wystarczająco bliskim sąsiedztwie do fazy lipidowej nHDL, aby wykluczyć wodę (Figura 5A). Po koinkubacji PON1 i nHDL oraz krótkiej ekspozycji na światło UV, spektrometria mas zidentyfikowała tylko jedną resztę w PON1, która wytworzyła addukt cholestanylu: Tyr71 (Figura 5, A i B). Zadziwiająco, oddzielne badania in vitro inkubujące kompleksy HDL-PON1 (1: 1, mol / mol) z MPO / H2O2 / Cl. system lub MPO / H2O2 / NO2. układ przy niskich poziomach utleniacza (H2O2 / APOA1, 10: 1, mol / mol) identyfikuje w sposób odtwarzalny podobny Tyr71 PON1 jako korzystne miejsce modyfikacji utlenowanej katalizowanej MPO, przy czym Tyr71 PON1 został wykryty jako 3-chlorotyrozyna lub addukt 3-nitrotyrozyny w peptydach tryptycznych w badaniach proteomicznych (dodatkowe rysunki 7, A i B). Niedawno opisano strukturę krystaliczną PON1 (47, 48), a PON1 Tyr71 znajduje się w pobliżu przypuszczalnego obszaru międzyfazowego hipotetycznej domeny wiążącej HDL (Figura 5C), co sugeruje, że zarówno Tyr71 z PON1 może wspierać interakcję HDL, jak i zależne od MPO. specyficzna miejscowo oksydacyjna modyfikacja PON1 w Tyr71 może osłabiać funkcję PON1 in vivo. Potencjalne fizjologiczne znaczenie utleniania PON1 Tyr71 przez MPO było dodatkowo poparte badaniami proteomicznymi PON1 odzyskanymi z ludzkiej blaszki miażdżycowej, w której ClTyr71 był bezpośrednio wizualizowany na peptydach trypsynowych PON1 (Suplementalna Figura 8). Wyniki te pokazują, że w prozapalnym środowisku ludzkiej blaszki miażdżycowej, gdzie wykazano miejscowe utlenianie APOA1 poprzez nitrowanie i chlorowanie przez MPO (6, 23, 35), białko PON1 związane z HDL jest również utleniane przez białko hemu. Figura 5PON1 Tyr71 jest funkcjonalnie ważnym miejscem dla interakcji HDL i celem katalizowanego przez MPO utleniania w ludzkiej blaszce miażdżycowej. (A) Schematyczna ilustracja tyrozylu PON1 znakowanego fotocholestanylem. (B) Rekonstytuowany HDL utworzony z zastosowaniem POPC / fotocholesterolu / APOA1 (100: 10: 1) inkubowano z PON1 i poddano działaniu światła UV, jak opisano w Metodach. Badania proteomiczne ujawniły addukt fotocholestanylu PON1 Tyr71 [Y (ch)] jako miejsca na PON1, które bezpośrednio oddziałują z cholesterolem, jak opisano w Metodach. m / z, stosunek masy do ładunku. (C) Struktura krystaliczna PON1 z nałożoną lokalizacją Tyr71 (czerwona) i hipotetyczna powierzchnia wiążąca HDL na podstawie analizy hydrofobowości. (D) Rekombinowany ludzki WT PON1 w porównaniu ze wskazanymi mutantami specyficznymi dla miejsca Tyr71 PON1 Tyr71 wygenerowano, wyizolowano, inkubowano z HDL, a następnie określono aktywność paraoksonaz zgodnie z opisem w Methods. Wyniki reprezentują średnią. SD z co najmniej 3 niezależnych eksperymentów. W dodatkowej serii badań staraliśmy się zbadać potencjalne znaczenie funkcjonalne potranslacyjnej modyfikacji oksydacyjnej Tyr71 PON1. Wykonano ukierunkowane badania mutagenezy rekombinowanego ludzkiego PON1, przy czym tyrozynę przekształcono w wiele alternatywnych aminokwasów (alaninę, kwas asparaginowy lub lizynę). Każda z rekombinowanych zmutowanych form PON1 i rekombinowana ludzka PON1 była następnie następnie oddzielnie inkubowana z nHDL (1: 1, HDL-PON1, mol / mol) w 37 ° C, a następnie określano ilościową aktywność katalityczną PON1. Funkcjonalne analizy rekombinowanego ludzkiego PON1 w porównaniu ze zmutowanymi formami PON1 ukierunkowanymi na miejsce (aka Tyr71Ala, Tyr71Asp lub Tyr71Lys) wykazały, że w każdym przypadku zmutowana forma PON1 wykazuje znacznie zmniejszoną aktywność katalityczną (Figura 5D)
[patrz też: akson szczecin, pluskwy ugryzienia, ph metria ]

0 thoughts on “leczenie nowotworów warszawa”

  1. [..] Oznaczono ponizsze tresci z artykulu oryginalnego: gabinet ginekologiczny warszawa[…]