Skip to content

kamienne kostki do drinków forum

4 miesiące ago

568 words

Obecne badania pokazują, że w stanach zapalnych inaktywacja oksydacyjna za pośrednictwem MPO przyczynia się do modulacji PON1 in vivo. Należy zauważyć, że funkcjonalne polimorfizmy mogą również przyczyniać się do zmian w aktywności PON1, ale wielkość zmian jest stosunkowo niewielka w porównaniu z szerokością poziomów aktywności PON1 obserwowanych w krążeniu systemowym (15, 55). Pomimo zainteresowania PON1 i HDL jako potencjalnymi środkami terapeutycznymi, podstawa strukturalna interfejsu PON1-HDL nie została jeszcze zdefiniowana. Nasze badania pokazują, że wiązanie PON1 z HDL jest ważne dla utrzymania aktywności PON1, z lipidowymi i białkowymi komponentami HDL wspierającymi oddziaływanie PON1 (Figura 4). Ponadto, stosując połączenie nowatorskich podejść biofizycznych, sprzężonych z ukierunkowaną mutagenezą i późniejszymi badaniami funkcjonalnymi, zarówno Tyr71 z PON1 i sekwencje APOA1 P1 (L38GKQLNLKL46) i P2 (S201TLSEKAK208) zidentyfikowano jako krytyczne reszty wspierające oddziaływanie HDL-PON1 ( Ryc. 3. 6). PON1 Tyr71 jednoznacznie zidentyfikowano jako miejsce kontaktu z fazą lipidową HDL przez tworzenie adduktu cholestanylu przy użyciu zrekonstytuowanej cząstki nHDL wytworzonej z użyciem nowego aktywowanego fotoaktywowalnym analogiem cholesterolu (Figura 5). Dwurodnik karbenowy utworzony na analogu cholesterolu po napromieniowaniu UV reaguje z H2O w sposób ograniczony do dyfuzji, co wskazuje, że oddziaływanie pomiędzy fazą lipidową HDL i PON1 Tyr71 jest dostatecznie ścisłe, aby wykluczyć wodę i sugeruje, że ugrupowanie fenolowe Tyr71 rozciąga się do fazy lipidowej po związaniu HDL (rysunek 8). Godne uwagi jest to, że ostatnie badania krystalograficzne PON1 w postaci związanej z ligandem wskazują PON1 Tyr71 jako krytyczną resztę, która ulega zmianie konformacyjnej po związaniu ligandu i odgrywa ważną rolę w sieci wiązania wodorowego w pobliżu miejsca aktywnego (figura 8 i odnośnik 48). ). Nasze badania potwierdzają funkcjonalną istotność PON1 Tyr71 dla interakcji HDL poprzez ukierunkowaną mutagenezę, ponieważ wiele mutantów PON1 pozbawionych Tyr71 wykazało zmniejszone wiązanie HDL, stabilność termiczną i aktywność enzymatyczną (Figury 5 i 6). Wreszcie, znaczenie tego osadu in vivo jest dodatkowo zasugerowane zarówno przez wykazanie, że jest on ukierunkowany na katalizowane przez MPO nitrowanie i chlorowanie w układach modelowych w fizjologicznych poziomach utleniacza (Suplementowa Figura 7) i przez wykrywanie 3-chloro-Tyr71 PON1, specyficzna potranslacyjna modyfikacja utworzona przez MPO in vivo, w PON1 odzyskanym z ludzkiej blaszki miażdżycowej (dodatkowa Figura 8). Co ważne, badanie struktury krystalicznej PON1 wskazuje, że posttranslacyjna modyfikacja pierścienia fenolowego Tyr71 z przestrzennym podstawnikiem (np. NO2, Cl) będzie również zakłócać sterycznie ścianami komory miejsca aktywnego i zapobiegać tworzeniu się wiązania wodorowego z PON1 przez Tyr71 Asp183 (rycina 8), krytyczna pozostałość, która moduluje dostęp do aktywnego miejsca PON1 (48). Podczas gdy miejsce oddziaływania PON1 z HDL było wcześniej nieznane, ostatnie struktury krystaliczne zgłaszane zarówno dla wolnych, jak i związanych z ligandem form PON1 sugerują możliwą powierzchnię wiązania międzyfazowego lipidu opartą na przewidywanej charakterystyce hydrofobowości białka (47, 48). Należy zauważyć, że PON1 Tyr71 znajduje się strukturalnie w pobliżu hipotetycznej domeny wiążącej lipidy w obrębie PON1 (Figura 5). Figura 8 Rola PON1 Tyr71 w wiązaniu HDL i katalizie. (A) Ilustracja wskazująca, jak Tyr71 PON1 może oddziaływać z grupą cholesterolu (pomarańczową) nHDL. Pokazano strukturę krystaliczną PON1 (PDB ID: 1V04) (fioletowy), dokowanie z fazą lipidową nHDL (cząsteczki POPC przedstawiono jako zielone linie, z atomem azotu grupy cholinowej reprezentowanej przez niebieskie kulki) i Tyr71 (czerwone) wystaje do fazy lipidowej, wchodząc w interakcję z cholesterolem
[podobne: olx augustow, pszeniczny brzuch, picie oleju lnianego ]

0 thoughts on “kamienne kostki do drinków forum”

  1. Moja corka2latka ma wraz zapalenie oskrzeli czy podczas tej choroby można ją kąpać